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關于Waters 凝膠色譜儀GPC凝膠滲透色譜法
更新時間:2019-10-16   點擊次數:1525次
  Waters凝膠色譜儀GPC主要由輸液系統(柱塞泵)、進樣器、色譜柱、檢測系統(示差折光檢測器、多波長UV、FTIR等)及數據采集與處理系統。
  凝膠滲透色譜法(GPC),即尺寸排阻色譜法(SEC),或凝膠過濾色譜(GFC)法,是一種色譜技術,通過使溶解的分子經過含有微孔填料的色譜柱,從而依據其大小進行分離。
  當樣品被分離并從色譜柱洗脫時,可通過單的濃度檢測器(傳統校正)或一系列檢測器(普適校正及三重檢測)進行表征。GPC技術用于表征天然及合成聚合物、生物聚合物、蛋白質或納米顆粒。
  當GPC色譜分離與光散射、粘度計以及濃度檢測器相結合(三重檢測)時,可提供分子量分布、分子大小、特性粘度以及大分子結構、構型聚集與支化方面的信息。
  根據所需凝膠體積,估計所需干膠的量。一般葡聚糖凝膠吸水后的凝膠體積約為其吸水量的2倍,例SephadexG-20的吸水量為20,1克SephadexG─200吸水后形成的凝膠體積約40ml。凝膠的粒度也可影響層析分離效果。粒度細胞分離效果好,但阻力大,流速慢。一般實驗室分離蛋白質采用100-200號篩目的的SephadexG-200效果好,脫鹽用SephadexG-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。
  對載體的要求:
  1.良好的化學穩定性和熱穩定性;
  2.有一定的機械強度;
  3.不易變形;
  4.流動阻力小;
  5.對試樣沒有吸附作用;
  6.分離范圍越大越好(取決于孔徑分布)等;
  7.載體的粒度愈小,愈均勻,堆積的愈緊密,色譜柱分離效率愈高。
  GPC載體的種類:
  1.交聯聚苯乙烯凝膠
  2.多孔性玻璃
  3.聚乙酸乙烯酯凝膠及聚丙烯酰胺凝膠
  4.木質素凝膠等
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